洛陽液氮保藏法的具體內容
發布時間:2021-10-23作者:點擊:1617
洛陽液氮保藏法也被稱為超低溫保藏法,它主要是利用微生物在低于-130°C的低溫下新陳代謝趨于停止的原理并在液氮中(-196°C的超低溫下)有效地進行菌種保藏的方法。這一方法操作簡便且保藏期一般可達到15年以上,因此是目前公認的菌種長期保藏技術之一、適用于各類微生物菌種的保藏。接下來就讓小編簡單的來為大家簡單介紹一下液氮保藏法的具體內容吧!
一般來說,采用洛陽液氮保藏時都需要購置超低溫液氮設備,且液氮消耗量大、費用高;其低溫保藏的保護劑一般選擇糊精、甘油、二甲基亞砜、血清蛋白、聚乙烯氮戊環以及吐溫80等;其常用的是甘油(10%!20%)且對不同的微生物要選擇不同的保護劑,且濃度應控制在不致微生物死亡為宜。
1、操作方法:把微生物細胞混懸于含保護劑(20%甘油,10%DMSO等)的液體培養基中(也可把含菌瓊脂塊直接浸入含保護劑的培養液中)并在分裝入耐低溫的安瓿瓶中后作緩慢預冷,然后移至洛陽液氮罐中的液相(-196℃)或氣相(-156℃)作長期超低溫保藏。
2、操作原則:“慢凍快溶”。
3、原理:利用微生物在-130℃以下新陳代謝趨于停止而有效地保藏微生物。0.5mol/L左右的甘油或二甲亞砜可透入細胞并通過降低強烈的脫水作用而保護細胞。
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